ساخت نانوحامل دندریمری پلی آمیدوآمین-پلی اتیلن گلیکول هدف گیرنده tag۷۲ برای انتقال ژن t-bid به سلول‏های توموری کولورکتال

Authors

fatemeh safarian

m.sc. student, department of medical biotechnology, faculty of medical science, tarbiat modares university, iran fatemeh rahbarizadeh

assistant professor, department of medical biotechnology, faculty of medical science, tarbiat modares university, iran said amanpour

assistant professor, cancer research center, institute of cancer, tehran university of medical sciences, iran zahra sharifzadeh

ph.d. student, national cell bank of iran, pasteur institute, iran

abstract

هدف: هدف از این تحقیق ساخت و بررسی اثر نانوحامل‏های پلی آمیدوآمین- پلی اتیلن گلیکول هدفمند شده با نانوبادی علیه tag72 برای انتقال سازه کد کننده ژن t-bid به سلول‏های آدنوکارسینومای کولون انسانی است. مواد و روش‏ها: ساب‏کلونینگ ژن نانوبادی در ناقل بیانی psj برای تولید انبوه پروتئین نانوبادی انجام و سپس نانوبادی با کاربرد ستون نیکل جداسازی شد. فرآیند جداسازی با sds-page و وسترن بلاتینگ تأیید شد. افزودن پلی اتیلن گلیکول به نانوذرات پلی آمیدوآمین با نسبت مولی 1 به 2 (پلی آمیدوآمین به پلی اتیلن گلیکول) و هدفمندسازی با نانوبادی علیه tag72 با نسبت مولی 1 به 1 انجام شد. بار سطحی و اندازه نانوذرات به‏ترتیب با دستگاه زتا سایزر مالورن و نانوسایت بررسی و کارایی حامل ژنی ساخته شده در انتقال ژن کشنده t-bid به سلول‏های آدنوکارسینومای کولون در محیط آزمایشگاه با آزمون‏های real time pcr و تعیین میزان مرگ و میر سلولی بررسی شد. نتایج: نتایج بررسی با نانوسایت و زتا سایزر مالورن، به‏ترتیب ساخت نانوذرات هدفمند با اندازه 92±162 نانومتر و پتانسیل سطحی 57/4+ را نشان می‏دهد. آزمون تأخیر حرکت در ژل، کارآیی حامل ساخته شده را برای دربرگیری و فشرده‏سازی سازه ژنی تأیید می‏کند. نتایج real time pcr افزایش بیان ژن هدف در سلول‏های توموری را تأیید می‏کند. نتیجه‏گیری: نتایج این مطالعه کارآیی دندریمرهای پلی آمیدوآمین در انتقال ژن و نیز تأثیر مثبت افزودن پلی اتیلن گلیکول و اتصال نانوبادی علیه tag72 به این نانوحامل ژنی (برای هدفمندسازی انتقال ژن به سلول) را تأیید می‏کند.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ساخت و بررسی اثر نانوپارتیکلهای پلی اتیلن گلیکول-پلی آمیدوآمین (pamam) هدفمندشده با نانوبادی علیه tag72 و حامل سازه کدکننده پروتئین کشنده t-bid

ژن درمانی یک راهکار انقلابی جدید در درمان سرطان است. ساخت حامل ژنی کارآمد و ایمن به سبب تأثیر در موفقیت انتقال ژن بسیار حائز اهمیت است. تاکنون حاملین ژنی متعددی، که به طور کلی در دو دسته حاملین ژنی ویروسی و غیرویروسی قرار میگرند، ساخته و بررسی شده اند. اگرچه حاملین ژنی ویروسی، هم در انتقال و هم تضمین بیان ژن انتقالی بسیار کارآمد هستند ولی مشکلات مربوط به ایمنی زیستی و هزینه های بالا برای شرایط ...

15 صفحه اول

پوشش دهی نانو ذرات اکسید روی توسط پلی اتیلن گلیکول

جذب سطحی پلیمرها به وسیله نانو ذرات، پایداری سوسپانسیون را در برابرکلوخه شدن بهبود می بخشد. در این مقاله، برای جلوگیری از کلوخه شدن، از نانو ذرات اکسید روی (ZnO)  به عنوان اکسید فلزی انتخابی و از پلی اتیلن گلیکول (PEG) به عنوان پلیمر جذب شونده انتخابی استفاده شده است. انجام عمل جذب، توسط طیف سنجی فرو سرخ (IR)، اندازه و ساختار کریستالی نانو ذرات توسط آنالیز پراش اشعه ایکس (XRD)، میزان جرم پلیمر ...

full text

انتقال سازه ژن درمانی توسط نانوذرات پلی پلکسی (نوع پلی اتیلن ایمینی هدفمندشده) به سلول‌های سرطانی روده بزرگ

 Background and Objectives: The aim of this study was preparation of polyethyleneimine (PEI) nanoparticles targeted with anti-TAG72 nanobody for delivery of t-Bid gene construct into the human colonic adenocarcinoma cells. Materials and Methods: First of all, purified recombinant nanobody was verified by SDS-PAGE, western blotting and ELISA. Targeted polyplexes were constructed by reacting ...

full text

بررسی اثر اصلاح سطحی نانوذرات دندریمری پلی آمیدو آمین با پلی اتیلن گلیکول بر کاهش سمیت سلولی

هدف: دندریمرهای پلی آمیدو آمین نسل 5 ابزارهای انتقال ژن چندمنظوره امیدوارکننده ای هستند که ویژگی های مطلوب متراکم کردن مولکول های dna را فراهم می کنند، هر چند، سمیت آن ها کاربردهای آن ها را محدود می سازد. سمیت دندریمرهای پلی آمیدو آمین به دوز کاربردی، شماره نسل و نوع آن بستگی دارد، به نحوی که نسل های پایین (پایین تر از g5) و انواع آنیونی دندریمرهای پلی آمیدو آمین سمیت کمتری را نسبت به نسل های ب...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۶۳-۷۴

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023